Dirigido a la obtención del CERTIFICADO DE PROFESIONALIDAD a través de las Competencias Profesionales Adquiridas R.D. 1224/2009 y R.D. 143/2021 del Ministerio de Educación y Formación Profesional
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- Material y métodos
- El ADN
- Los enzimas
- Los nucleótidos
- Los cebadores
- Limitaciones y problemas de la PCR (tamaño secuencias limitado, PCR previa, contaminación, inespecifidad de cebadores,…)
- Factores que afectan a la movilidad del ADN en el gel (masa molecular, voltaje, composición de las bases, temperatura, solución amortiguadora,…)
- Tipos de electroforesis: PFGE (Pulsed Field Gel Electroforesis), OFAGE (Orthogonal Field Alternative Gel), FIGF (Field Inversion Gel Electroforesis), CHEF (Contour Clamped Homogeneus Electric Field), Electroforesis preparative.
- Aplicaciones: Análisis comparativos de patrones de restricción cromosómicos, construcción de mapas cromosómicos, topología y tamaño de cromosomas, análisis de elementos extracromosómicos
- Factores que influyen en la hibridación.
- Composición de las bases.
- Concentración de ADN/ARN y tiempos Cot y Rot
- Concentración y tamaño de la sonda
- Concentración ADN diana
- Desnaturalización del ADN diana y fijación a un soporte.
- Marcaje de una sonda monocadena
- Hibridación: mezcla y renaturalización
- Detección de los híbridos
- Medio de reacción
- Polímeros inertes
- Tiempos de hibridación y mecanismos de detección.
- Tipos de hibridación (soporte sólido, en fase líquida, in situ, in situ sobre cromosomas, in situ de bacterias para clonaje).
- Método Southerm
- Métodos de transferencia (por capilaridad, por vacío, electroforético)
- Aplicaciones del Método Southerm
- Mapas de restricción
- Detección de polimorfismos (RFLP, VNTR, STR) y deleciones.
- Secuenciación química, método de Maxam y Gilbert
- Secuenciación enzimática, método de Sanger o de los dideoxinucleótidos.
- Tipos de secuenciaciones enzimáticas (Cíclica, múltiple, automática, quimioluminiscente)
- Utilidad: analizar el genoma completo de un organismo
- Fundamento: hibridación con sondas
- Soporte: placas microtitulación o membranas de blotting
- Fabricación: pueden ser creados en el laboratorio o usando robótica : Macroarray: señales > 300 micras y Microarray: pocillos < 200 micras
- Introducción a la Bioinformática
- Consulta de Bases de datos en biología molecular
- Alineamiento de secuencias
- Predicción de genes
- Introducción a los microarrays de DNA
- Definición de genoma, gen y cromosoma
- Organización, estabilización y localización del genoma
- Estructura del ADN
- Estructura del ARN
- El código genético
- Secuencias codificantes versus no codificantes
- Citogenética. El cariotipo normal en los roedores de laboratorio
- Anomalías del número de cromosomas (Heteroploidías)
- Anomalías de la estructura de los cromosomas
- Genético
- Congénito
- Hereditario
- Modelos provenientes de mutaciones espontáneas o inducidas
- Modelos generados por transgénesis
- Modelos generados in Vitro por manipulación de células ES
- Modelos generados por transgénesis condicional
- Modelos animales del desarrollo embrionario
- Diagnóstico prenatal rápido de aberraciones cromosómicas por PCR
- Diagnóstico citogenético
- Diagnóstico prenatal de enfermedades hereditarias
- VNTR
- STR
- Modelos murinos de enfermedades hereditarias simples (mendelianas): Desórdenes de la visión, de la audición, neurológicos y neuromusculares. Enfermedades de los huesos y cartílagos, de la piel y el pelo, hematológicas, inmunodeficiencias y metabólicas
- Modelos murinos de enfermedades hereditarias complejas (multigénicas): Cáncer, obesidad, diabetes, etc.
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Los tipos de ácido nucleico más conocidos son: ADN (Ácido Desoxirribonucleico) y ARN (Ácido Ribonucleico), se diferencian en:
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